6 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Гепатит с количественный анализ расшифровка

Количественное определение РНК вируса гепатита С (HCV) методом ПЦР

Гепатит С часто протекает скрыто, без очевидных клинических проявлений. Чтобы определить наличие вируса в организме и поражение им печени требуется пройти соответствующее исследование — ПЦР количественный на гепатит С.

О чем я узнаю? Содержание статьи.

Что такое количественный ПЦР?

Количественный ПЦР — исследование крови или другой физиологической жидкости, которое позволяет определить количественную вирусную нагрузку на организм.

Заболевания, в зависимости от тяжести протекания, отражаются присутствием в крови определённого количества (мл на 1 см3) возбудителя инфекции. Каждый живой организм имеет в своём составе белки, рибонуклеиновую (РНК) и дезоксирибонуклеиновую (ДНК) кислоты.

Каждый вирус имеет характерные только для него РНК, ДНК, белки. Суть метода полимеразной цепной реакции в том, что он указывает количество РНК конкретного организма (например, вируса определённого генотипа) в 1 мл жидкости. Таким образом, выясняется степень и тяжесть заболевания.

При гепатите С, количественный ПЦР показывает сколько в исследуемом материале РНК вируса. Предварительно проводят качественный анализ, выясняя его наличие.

Из всех существующих способов определения возбудителя, а также его количества, полимеразная цепная реакция — наиболее точный метод. Он призван обнаружить сам вредоносный организм, а не последствия его пребывания (антитела).

Когда и кому необходимо сдавать количественный ПЦР на гепатит С?

Терапия любого заболевания допустима только после установления точного диагноза. Врач сбирает анамнез, оценивает клинические проявления недомогания, а также назначает дополнительные лабораторные обследования.

Прежде чем доктор поставит диагноз, подберёт лечение, необходимо количественное определение РНК вируса гепатита С. Этот анализ назначается не всем пациентам, а при конкретных показаниях:

  • контакт с больным гепатитом С;
  • симптомы заболевания печени;
  • клинические проявления цирроза;
  • в биохимическом анализе крови показатели активности АЛТ, АСТ выше нормы;
  • подозрение на инфицирование гепатитом С;
  • выявлены антитела к HCV при иммуноферментном исследовании крови;
  • уточнение диагноза;
  • определение вирусной нагрузки, чтобы доктор мог выбрать тактику, правильно составить схему лечения;
  • контроль эффективности проводимой терапии в динамике (1, 4, 12, 24 недели после начала лечения);
  • динамика протекания заболевания;
  • при подозрении на смешанные поражения железы;
  • по окончании лечения гепатита для периодической проверки, чтобы исключить рецидив.

Как проходит обследование?

Чтобы сделать количественный ПЦР вирусной РНК гепатита С, надо соблюдать методику выполнения исследования:

  1. Лучше всего для тестирования подходит венозная кровь. Анализы сдаются натощак. Пациенту не рекомендуют есть жирную и жареную пищу, пить спиртное за два дня до манипуляции.
  2. После забора биологического материала, его доставляют в лабораторию, обрабатывают.
  3. ПЦР состоит из трёх этапов (подготовка, увеличение копий ДНК возбудителя, идентификация) на каждом из которых используется определённое оборудование и реактивы.
  4. Образцы, взятые для исследования, маркируются. Из них с помощью реагентов выделяют РНК вируса, обозначенного качественным ПЦР.
  5. Процесс амплификации (создание и увеличение копий) проходит несколько раз посредством изменения температуры материала (нагревания, охлаждения) с использованием реактивов.
  6. На последнем этапе происходит определение вирусной нагрузки. Результат исследования интерпретирует лечащий врач, у которого есть расшифровка, таблица значений и итоги предварительной диагностики.

Расшифровка результатов (таблица)

После количественной полимеразной цепной реакции, данные о вирусной нагрузке на печень и организм в целом отображают в бланке. Количество РНК возбудителя выражается как МЕ/мл (международные единицы/миллилитры). Данные обычно выводятся в виде таблицы, в которой представлены:

  • норма количественного ПЦР при гепатит С;
  • полученный результат;
  • другие параметры.

Значения показателей вирусной нагрузки при гепатите С

ПоказательИнтерпретация
ОтрицательныйРНК возбудителя в биологическом материале не обнаружено
0 — 1,8Х10^2МЕ/млКоличество генетического материала вируса ниже установленного референтного значения
1,8Х10^2МЕ/мл — 8Х10^5МЕ/млНевысокая вирусная нагрузка.
8Х10^5МЕ/мл — 2,4Х10^7МЕ/млВысокая вирусная нагрузка
2,4Х10^7МЕ/мл и болееПревышена верхняя граница значений.

Показатели отчасти зависят от типа и чувствительности теста. Поэтому расшифровать результат анализа может только доктор, который учитывает все параметры.

Лечащий врач, исходя из результатов анализов, собранного анамнеза, клинических признаков подберёт противовирусную терапию. Интенсивность её будет зависеть от количества найденного генотипа вируса в образце.

Возможны ли ошибки при количественном ПЦР на гепатит С?

Любое лабораторное исследование может иметь погрешность, если не будут соблюдены условия его проведения на всех этапах (от подготовки к процедуре до интерпретации результатов). Количественная полимеразная цепная реакция – один из наиболее достоверных методов определения вирусной нагрузки. Но при нарушении методики она может давать ошибочные результаты, так как присутствует человеческий фактор.

Чтобы максимально избежать ложноположительных или неверных данных, требуется выполнять все необходимые требования диагностики:

  1. Прежде чем проводить количественный ПЦР рекомендуется провести иммунологическое исследование крови на выявление антител к гепатиту С. Кроме этого, требуется определить генотип вируса.
  2. Пациенту важно подготовиться к сдаче анализов в соответствии с рекомендациями. Чтобы уменьшить вероятность ошибки в тесте, надо сообщить лаборанту о приёме лекарств (если такой момент имеет место). На прохождение ПЦР влияет употребление запрещённой пищи, стресс, вредные привычки, физические нагрузки, различные заболевания.
  3. Лаборант, который обрабатывает образец биологического материала должен быть компетентен, знать методику проведения количественного ПЦР, а также работу оборудования. Правильная идентификация, подсчёт копий – основа верного результата
  4. Качество, способ, сроки хранения реактивов должны соответствовать заявленным требованиям.
  5. Соблюдение температурного режима на всех этапах реакции обязательно.

Правила и рекомендации по подготовке, сбору материала, проведения количественного ПЦР необходимо соблюдать для достижения 100% точности полученного результата. Ошибочные данные приводят к неправильному выбору тактики лечения и неэффективности терапии.

Что делать, если наличие РНК вируса подтвердилось?

При подозрении на инфицирование гепатитом С надо обязательно проконсультироваться с врачом. Если проведена диагностика, а ПЦР положительная или её количественные показатели говорят о наличии вирусной нагрузки, это однозначно повод безотлагательно посетить медучреждение.

Доктор, расшифровав результаты анализов, назначит лечение. Правильно выбранные лекарства, техника терапии, своевременное начало приёма медикаментов помогут избежать патологических изменений структуры и работы печени.

Гепатит С — тяжёлое вирусное заболевание, которое может привести к необратимым последствиям для человека. Ранняя, точная диагностика (количественный ПЦР) даёт возможность увеличить вероятность выздоровления в несколько раз.

Гепатит с количественный анализ расшифровка

Выявление ДНК HBV методом ПЦР

Для лабораторного обследования и выявления наличия диагноза гепатита В в крови применяют метод ПЦР. Способ рассмотрения полимеразной цепной реакции является самым современным в области выявления заболевания.

Итоговая расшифровка показывает, имеются ли следы генного присутствия возбудителя в клетках печени.

Если при проведении исследования соблюдаются все принципы, то результат обладает абсолютной точностью. Метод используется для постановки диагноза, применяется в процессе лечения и при противовирусной терапии.

  1. Качественное ПЦР по итогу имеет всего два значения: «обнаружено» и «не обнаружено». Процедура проводится каждому пациенту с подозрением на гепатит. При средней чувствительности теста на ПЦР в диапазоне от 10 до 500 МЕ/мл, при низких содержаниях ДНК вируса в крови, генный материал обнаружен не будет.
  2. Количественное ПЦР. В отличие от качественного, указывает не только на гепатит В. Количественный анализ указывает насколько норма здорового человека далека от показателей больного в числовом выражении. Метод позволяет оценить стадию заболевания и назначить лечение. Чувствительность теста ПЦР при количественном следовании выше, чем при качественном методе. В основе лежит подсчет выявленной ДНК, который выражается в копиях на миллилитр или МЕ/мл.

Кроме того, количественное ПЦР дает понимание воздействия лечения и корректности подобранной терапии. В зависимости от количества генного материала вируса может быть принято решение о сокращении срока лечения или, наоборот, о его продлении и усилении.

Биохимический анализ крови при гепатите В

Метод биохимического анализа является обязательным для получения полной клинической картины течения заболевания. Этот диагностический метод дает понимание о работе внутренних органов (печени, почек, желчного пузыря, щитовидной железы и других). Расшифровка дает понимание о скорости обмена веществ в организме, возможных патологиях метаболизма. Развернутые показатели укажут на недостаток витаминов, макроэлементов и минералов, необходимых для здоровья и жизни человека.

Сдать анализ на гепатит можно в любом другом диагностическом центре (Инвитро, Гемотест и др). Биохимический анализ крови при выявлении гепатита В включает следующие компоненты.

Количественный анализ фермента АЛТ (АлАт)

Этот фермент наиболее часто встречается в повышенных концентрациях при остром и хроническом гепатите. Вещество содержится в печеночных клетках, а при поражениях органа посредством кровотока попадает в сосуды.

Количество и концентрация в крови при вирусном заболевании постоянно меняется, поэтому исследования проводятся не реже, чем раз в квартал. АЛТ отражает не только активность вируса гепатита, но и степень вызванных им нарушений в печени. Уровень АЛТ возрастает при повышении количества токсических веществ печеночного происхождения и в присутствие вируса.

Количественный анализ на АСТ-фермент

Белок является составляющей важнейших органов человека: печени, нервной ткани, ткани почек, скелета и мышц. Фермент участвует и в построении самой главной мышцы — сердца. Высокие показатели АСТ у больного с гепатитом В может сигнализировать о фиброзе печени. Аналогичная ситуация возникает при алкогольном, медикаментозном или любом другом токсическом поражении клеток печени.

Зашкаливающие показатели являются признаком разрушения печени на клеточном уровне. Необходимо учитывать при постановке диагноза соотношение АСТ и АЛТ (коэффициент де Ритиса). Одновременное повышение концентрации обоих ферментов — признак некроза печени.

Вещество образуется в селезенке и печени, как результат распада гемоглобина в их тканях. Этот компонент входит в состав желчи. Выделяют две фракции белка: прямой билирубин (связанный) и непрямой билирубин (свободный). При возрастании в крови связанного билирубина имеет смысл подозревать гепатит или другие поражения печени. Это непосредственно связано с цитолизом печеночных клеток.

Если возрастает количество непрямого билирубина, то, скорее всего, присутствует поражение паренхимотозной ткани либо синдром Жильбера. Высокий уровень билирубина по результатам анализа может стать следствием непроходимости желчных протоков. При уровне билирубина свыше 30 микромоль на литр у больного проявляется желтушный оттенок кожи, моча становится темной, а белки глаз изменяют свой цвет.

Синтез этого белка происходит в печени. Если его количество снижено, то это свидетельствует об уменьшении синтеза ферментов в органе вследствие возникновения тяжелых поражений печеночных клеток.

Общий белок

Если количество общего белка становится существенно ниже, чем принятая норма, то это говорит о замедлении функционирования печени.

Читать еще:  Диагностика печени при помощи анализов на алт и аст

Фермент, используемый при обнаружении механической желтухи и холециститов. Возрастание уровня ГГТ является сигналом токсического поражения печени. Может провоцироваться хронических алкоголизмом и бесконтрольным употреблением медикаментов. Белок особо чувствителен к токсинам и алкоголю, под их влиянием его активность растет стремительно. Сохранение высокой концентрации ГГТ в крови в течение длительного времени говорит о тяжелых поражениях печени.

Является продуктом белкового обмена, происходящего в печени. Резкое снижение уровня — сигнал замедления работы органа.

Описание диагностического метода

Высокочувствительный метод ПЦР-диагностики гепатита В относится к категории генно-инженерных молекулярно-биологических исследований. Посредством него определяется количество вирусной ДНК в биологическом материале пациента и допустимая норма. По полученным результатам устанавливается число вирусных частиц в единице объема. Материалом для диагностического теста является венозная кровь пациента. Забор желателен натощак из-за возможного влияния хилезной сыворотки на результат исследования.

Значимость результата числа вирусных частиц, полученного метода ПЦР, превышает значение иммуноферментных исследований. Поскольку анализ в режиме real-time показывает присутствие возбудителя заболевания в крови, его информативность выше прочих. Если ИФА свидетельствуют только о наличии антител, что наблюдается с 4-х недель инкубационного периода и сохраняется более 8 недель после элиминации вируса из крови, то полимеразная цепная реакция однозначно подтверждает активное течение заболевания или его излечение, характеризует динамику назначенной терапии.

Полимеразная цепная реакция с количественным определением частиц возбудителя решает диагностические вопросы в пользу прекращения лечения в связи с выздоровлением или продолжения терапии из-за ее недостаточной эффективности. Метод максимально специфичен в отношении вируса HBV и отличается приемлемой погрешностью.

РНК вируса гепатита С, количественное определение

Что такое РНК вируса гепатита С, количественное определение?

Количественное определение РНК вируса гепатита методом ПЦР.

Аналитические показатели: выявление РНК вируса гепатита С методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и определение вирусной нагрузки в плазме крови.

Определяемый фрагмент – консервативный участок генома вируса гепатита С. Специфичность определения – 98%. Чувствительность определения – от 600 МЕ/мл вирусных частиц в плазме крови.

Почему важно делать РНК вируса гепатита С, количественного определения?

Количественная характеристика содержания РНК вируса гепатита С в клинических образцах важна для оценки эффективности противовирусной терапии и имеет прогностическое значение для определения хронизации этого гепатита. Если концентрация вируса меньше 8х105 МЕ/мл (2х106 копий/мл), то прогноз курса лечения благоприятный, если выше – то рекомендуют использовать другие схемы лечения. Вирусная нагрузка ниже 8х105 МЕ/мл (2х10 копий/мл) наряду с определением генотипа вируса является независимым и самым точным параметром эффективности лечения. Снижение концентрации РНК вируса гепатита С к третьему дню от начала терапии на 85% является быстрым и точным параметром для предсказания эффективности терапии, приводящей к раннему вирусологическому ответу.

При каких симптомах делается РНК вируса гепатита С, количественное определение?

Показания к назначению анализа:

  • Положительный качественный тест на наличие РНК вируса гепатита С в сыворотке крови.
  • Определение тактики лечения пациентов.
  • Точная оценка эффективности лечения.

Вас что-то беспокоит? Вы хотите узнать более детальную информацию о РНК вирусе гепатита С, количественном определении или других анализах? Или же Вам необходим осмотр врача? Вы можете записаться на прием к доктору – клиника Eurolab всегда к Вашим услугам! Лучшие врачи осмотрят Вас, проконсультируют, окажут необходимую помощь и поставят диагноз. Вы также можете вызвать врача на дом. Клиника Eurolab открыта для Вас круглосуточно.

Как обратиться в клинику: Телефон нашей клиники в Киеве: (+38 044) 206-20-00 (многоканальный). Секретарь клиники подберет Вам удобный день и час визита к врачу. Наши координаты и схема проезда указаны здесь. Посмотрите детальнее о всех услугах клиники на ее персональной странице.

Если Вами ранее были выполнены какие-либо исследования, обязательно возьмите их результаты на консультацию к врачу. Если исследования выполнены не были, мы сделаем все необходимое в нашей клинике или у наших коллег в других клиниках.

Необходимо очень тщательно подходить к состоянию Вашего здоровья в целом. Есть много болезней, которые по началу никак не проявляют себя в нашем организме, но в итоге оказывается, что, к сожалению, их уже лечить слишком поздно. Для этого просто необходимо по несколько раз в год проходить обследование у врача. чтобы не только предотвратить страшную болезнь, но и поддерживать здоровый дух в теле и организме в целом.

Если Вы хотите задать вопрос врачу – воспользуйтесь разделом онлайн консультации. возможно Вы найдете там ответы на свои вопросы и прочитаете советы по уходу за собой. Если Вас интересуют отзывы о клиниках и врачах – попробуйте найти нужную Вам информацию на форуме. Также зарегистрируйтесь на медицинском портале Eurolab. чтобы быть постоянно в курсе последних новостей и обновлений информации на сайте о РНК вирусе гепатита С, количественном определении и других анализах на сайте, которые будут автоматически высылаться Вам на почту.

Если Вас интересуют еще какие-нибудь анализы, диагностики и услуги клиник в целом или у Вас есть какие-либо другие вопросы и предложения – напишите нам. мы обязательно постараемся Вам помочь.

Количественный анализ на гепатит Ц

Ведущий метод диагностики воспаления печени — количественный анализ на гепатит С. Определение болезни подразумевает проведение количественного, качественного анализа с проверкой генотипа вируса, что дает возможность определить основные параметры течения заболевания. Ввиду способности к мутации требуется точное и своевременное диагностирование с правильно расшифровкой данных для разработки терапевтической схемы.

С 2012 года болезнь гепатита C официально считается полностью излечимым заболеванием. Но для этого важна своевременная диагностика.

Что такое ПЦР?

Полимеразная цепная реакция или же ПЦР — метод, позволяющий выявить гепатит на начальных стадиях. Чувствительность немного ниже ИФА. Метод определяет ДНК- фрагменты вируса в пробе крови пациента даже в малых количествах. Исходя из этого врач правильно вычисляет именно возбудителя инфекции, а не его продукты жизнедеятельности. По результатам анализа ПЦР есть возможность выявить даже следы вируса и его генотип.

Видовое разнообразие анализов

В ПЦР выделяют 3 вида анализа:

  • Качественный. ПЦР гепатита С, который основывается на поиске иммуноглобулинов (антител) типа M и G, характеризующих факт заражения. Анализ может выдать — «не обнаружено», что будет считаться нормой.
  • Количественный. Подтверждает диагноз, позволяет контролировать лечение, указывает на риск заражения других людей. Определяется количество в международной системе единиц — МЕ/мл. Показатель рассчитывается из количества РНК-вируса в 1 мл пробы крови. Высокий результат указывает на повышенный риск инфицирования других людей.
  • Генотипирование. Метод, основывающийся на выявлении генотипов HCV, которых насчитывается 7.

Перед сдачей крови на проверку важно придерживаться правил:

  • За 8 часов до анализов в последний раз покушать.
  • Не пить спиртного за 2 дня, желательно не курить в это время или хотя бы за 1—2 часа до.
  • Сообщить о приеме лекарств.

Вернуться к оглавлению

Показания к применению

Для проведения количественного метода исследования нужен ряд показаний, без которых эта диагностика невозможна. К ним относится:

  • выявление качественным анализом антител РНК-вируса;
  • присутствие хронического или острого вида заболевания;
  • планирование тактики лечения;
  • обнаружение микст-гепатитов при диагностировании.

Вернуться к оглавлению

Как проводится количественный ПЦР?

Определение концентрации патогена — суть исследования. Диагностика определяет степень тяжести заболевания, что позволяет полностью увидеть клиническую картину болезни. С помощью это вида ПЦР обнаруживают, какая вирусная нагрузка при гепатите С. После проведения расшифровки полученных данных анализа, врачи назначают лечение, в ходе которого делают забор крови на 4, 12, 16 и 24-й неделях. По завершении 12-й должно быть улучшение, в обратном случае метод лечения стоит заменить.

Расшифровка

Найденное в крови количество HCV, влияет на вероятность, с которой вирус гепатита передается окружающим — чем выше, тем больше вероятность. За счет этой процедуры составляется правильный план дальнейшего лечения. Полученные в ходе процедуры результаты измеряются в единицах МЕ/мл и копий/мл. Расшифровать показатели можно только после пересчета полученного количества с учетом коэффициента (КП). Есть 2 метода:

  • HCV Monitor с КП в МЕ — 2,7;
  • LCX HCV RNA с КП — 3,8.
Таблица № 2. Расшифровка результатов генотипирования:

РезультатыЗначение
Генотипы 1а, 1bОчень высокий риск хронизации инфекции и развития тяжелых осложнений
Генотипы 2, 3аВ большинстве случаев в течение 24 недель достигается планированный терапевтический эффект
Генотип 4Труднее поддается лечению, требует доз препаратов, отличных от применяемых при терапии с генотипами 2 или 3

Вернуться к оглавлению

Норма показателей

Нормой считается показатель число, которого равно нулю, что свидетельствует об отсутствие вируса в крови человека. Для зараженных людей понижение вирусной концентрации считается приближением к здоровому состоянию. Если показатели варьируются от 600 МЕ/мл до 3*10 в ст. 4 МЕ/мл, то применяемое лечение считается успешным.

Международный показатель — единица измерения, которая определяет количество РНК в 1 мл крови. Значение — признак риска заражения окружающих людей.

Отклонения и причины их возникновения

Если происходит изменения результатов и их выхождения за рамки нормы, значит, произошел рецидив. Это говорит о том, что заболевание снова прогрессирует и количество вируса в организме постепенно увеличивается. Результаты во многом зависят от тех, кто делает анализы. Ошибочные они в случае, если образец с кровью подвергся загрязнению или присутствовали ошибки в проведении анализа. Дополнительной причиной становится присутствие в крови веществ, направленных на замедление реакции ПЦР. Важно заметить, что для точного результата необходимы другие анализы: биопсия и биохимическое исследование.

Читать еще:  Генотипы вируса гепатита с лечение как определить прогноз

Количественный анализ на гепатит С: как подготовиться, расшифровка, норма

Количественная ПЦР – молекулярно-биологический анализ, при котором подсчитывается количество генетического материала возбудителя в крови. Исследование на гепатит С (количественно) выполняется после подтверждения диагноза для определения вирусной нагрузки. Полимеразная цепная реакция характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью. Поэтому анализ считается золотым стандартом в диагностике гепатита С.

Что такое количественный анализ на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – анализ, который основан на определении участков РНК или ДНК, специфичных для возбудителя инфекции. В качестве исследуемого материала чаще используется венозная кровь. Тест обладает высокой специфичностью, так как при исследовании плазмы выявляется генетический материал конкретного вируса.

Метод полимеразной цепной реакции впервые был запатентован в 1983 году Кэри Мюллисом. Внедрение в клиническую практику молекулярно-биологического анализа совершило переворот в диагностике бактериальных, грибковых и вирусных болезней.

ПЦР количественный при гепатите С – исследование, при котором подсчитывается количество РНК ВГС (HCV RNA). По результатам определяют вирусную нагрузку, от которой зависят:

  1. дозировка медикаментов;
  2. продолжительность противовирусной терапии (ПВТ);
  3. вероятность осложнений;
  4. успешность лечения.

РНК вируса гепатита С (ВГС) обнаруживается спустя 10-12 суток после заражения, когда до первых симптомов еще далеко. Поэтому исследование применяется для ранней диагностики HCV-инфекции.

Когда нужно сдать тест

Молекулярно-биологический анализ назначается при положительном результате скринингового обследования на гепатит – ИФА и качественной ПЦР. Исследование применяется для:

  • подтверждения диагноза;
  • определения уровня виремии (вирусной нагрузки);
  • прогнозирования течения болезни;
  • оценки результативности лечения;
  • диспансерного обследования после ПВТ.

ПЦР-диагностика рекомендована всем людям с вирусным гепатитом. Точность исследования варьируется в пределах 97-99%, поэтому риск ложных результатов минимален.

Показания для анализа:

  • обнаружение антител к вирусу гепатита С (anti-HCV);
  • признаки воспаления печени;
  • качественное выявление РНК ВГС;
  • острый и вялотекущий гепатит;
  • микст-гепатиты.

Количественный тест выполняется на всех этапах заболевания. Чтобы оценить результативность терапии, вирусную нагрузку определяют перед, во время и после ПВТ. Если уровень виремии высокий, увеличивается риск цирроза и рака печени. Поэтому для профилактики осложнений назначают антивирусные средства в больших дозах.

Подготовка и сдача крови

Количественный анализ ПЦР проводится в лабораторных условиях. Домашних тестов для выявления числа вирусов в крови не существует.

Объективность результатов зависит от правильности подготовки к исследованию. Чтобы снизить вероятность погрешностей, нужно:

  1. сдавать венозную кровь натощак;
  2. выполнять процедуру до 12 часов дня;
  3. не есть за полсуток до визита в лабораторию;
  4. отказаться от газированных напитков и кофе в день обследования.

Забор крови у женщин рекомендуется выполнять за 1-2 дня до менструации. В этот период иммунная защита ослабевает, поэтому сывороточная концентрация возбудителя максимальная.

За 5-7 суток до анализа исключают алкогольные напитки, жирную и острую пищу. Врачи не советуют курить за 2-3 часа до забора крови.

Точность ПЦР-диагностики на гепатит С во многом зависит от правильности сбора и транспортировки биоматериала:

  • забор крови осуществляют в условиях процедурного кабинета;
  • пользуются только одноразовыми стерильными шприцами;
  • для исключения заражения биоматериала соблюдают правила асептики и антисептики.

Контейнер с пробой маркируют в присутствии пациента, после чего отправляют в лабораторию.

Как выполняют подсчет вирионов

Во время количественной ПЦР возбудителя идентифицируют путем обнаружения РНК в плазме крови. Это возможно за счет удвоения участка нуклеиновой кислоты вируса в среде фермента РНК-полимеразы. Во время анализа копируются (амплифицируются) только определенные участки генома.

Подсчет количества РНК вируса гепатита осуществляют в 3 этапа:

  1. Выделение генетического материала. Чтобы очистить вирусную РНК от крови и белковых включений, биоматериал пропускают через сорбенты, отмывают в растворе, центрифугируют, а потом обезвоживают. В результате остается осадок с вирусными частицами, который растворяют в специальной жидкости. На выходе получается РНК вируса гепатита в элюенте.
  2. Амплификация. Анализ выполняется в приборе-термостате, в котором периодически подогревают и охлаждают пробирки. При одном исследовании делают до 35 циклов, состоящих из 3 фаз: денатурация (разрушение) РНК, отжиг и синтез нуклеиновых кислот матричной цепи. За несколько десятков циклов в пробирке образуется множество фрагментов РНК, достаточное для подсчета количества генетического материала.
  3. Электрофорез. Пробирку с копиями вируса гепатита помещают в агарозный гель. Образец подключают к источнику тока, под действием которого фрагменты РНК разделяются. Благодаря электрофорезу копии нуклеиновых кислот становятся различимыми в свете ультрафиолета. Затем с применением специального оборудования подсчитывают количество РНК вируса.

В настоящее время для определения уровня виремии все чаще проводят ПЦР-диагностику в реальном времени (Real-Time PCR). В отличие от стандартного анализа, в образец крови вводят раствор с флуоресцентными метками. Благодаря этому удается подсчитать количество амплифицированной РНК ВГС в реальном времени после каждого цикла.

Результаты количественного определения РНК

Количественная оценка позволяет судить об уровне виремии, то есть активности вирусного процесса. С учетом результатов анализа гепатолог подбирает дозу лекарства, определяет продолжительность терапии гепатита С.

Расшифровка количественного анализа на гепатит С:

Данные количественной ПЦР, в МЕ/млТрактовка
не обнаруженовариант нормы, вируса в крови нет
менее 150содержание РНК ниже линейного диапазона концентраций, минимальная вирусная нагрузка
150-3*10 4низкий уровень виремии
от 3*10 4 до 8*10 5средняя вирусная нагрузка
более 8*10 5содержание РНК ВГС выше линейного диапазона концентраций

Вирусная нагрузка – важный показатель, который учитывается при разработке схемы терапии. Если уровень виремии минимальный или низкий, прогноз течения гепатита и результативности ПВТ благоприятный. Ситуация ухудшается при средней и высокой вирусной нагрузке. Такие пациенты подвержены осложнениям – фиброзу, жировому гепатозу, циррозу.

Уровень виремии не отражает степень повреждения печеночной паренхимы или тяжесть течения гепатита. Чтобы определить серьезность изменений в печени, прибегают к инструментальному обследованию – фибросканированию, биопсии и гистологическому анализу.

Сколько по времени делается качественный и количественный анализ и примерная цена

Чтобы провести исследование на гепатит С (качественный и количественный ПЦР-анализ), посетите лабораторное отделение поликлиники, частную клинику или лабораторию. Стоимость диагностики в Москве зависит от:

  1. типа анализируемого биоматериала;
  2. чувствительности применяемой тест-системы;
  3. количества определяемых инфекций.

Примерная стоимость лабораторного анализа

Тип анализаЦена в рублях
забор крови170-200
качественная ПЦР750-1000
количественная ПЦР (реал-тайм)3800-4000
генотипирование1350-1400

Анализ ПЦР на гепатит С делается не более 3 часов. Забрать окончательные результаты можно уже в течение 1-2 суток.

Бывает ли ложный результат

Генетический материал возбудителя гепатита выявляется в крови спустя 1.5 недели после заражения. До этого периода содержание РНК ВГС в крови так мало, что ее нельзя обнаружить в лабораторных условиях. Для оценки вирусной нагрузки рекомендуется пользоваться высокочувствительными тест-системами: 150-1*10 8 МЕ/мл.

ПЦР-диагностика – исследование, достоверность результатов которого достигает 97-99%. Искажение данных возможно при:

  1. игнорировании правил подготовки к исследованию;
  2. нарушении требований антисептики;
  3. несоблюдении методики анализа крови;
  4. неправильном заборе и хранении биоматериала.

Перед обследованием пациент должен сообщить врачу о приеме медикаментов, так как их компоненты могут влиять на активность возбудителя и результаты исследования.

ПЦР-диагностика – высокоточное исследование, при котором определяют наличие и количество копий возбудителя инфекции. Получение ложноотрицательных результатов почти невозможно. Погрешности выявляются в единичных случаях при диагностике хронического гепатита вне обострения.

Гепатит С. Количественный анализ. Норма, расшифровка результатов

Гепатит С. Чем он опасен для человека. Как диагностировать инфекцию. Что нужно для проведения анализа

Вирус гепатита С. Чем он опасен. Как вовремя его идентифицировать.

Вирус гепатита С или ВГС – инфекционное заболевание, которое несет в себе молекулу рибонуклеиновой кислоты.

Этот тип вируса умеет легко приспосабливаться к условиям обитания и часто трансформируется в разные формы болезни, поэтому нашей защитной системе организма так сложно с ним справиться. Классифицируют шесть главных генетических типов инфекции и десятки подтипов. В наших краях зачастую встречаются первые три типа вируса.

По статистике лишь четверть случаев заболевания ВГС протекают без осложнений, во всех остальных случаях норма, если инфекция перерастает в хронический процесс, который пагубно влияет на внутренние органы. Так гепатит может осложняться печеночным фиброзом – процесс замены печеночных клеток. Дальше осложнения развиваются по цепной реакции: вследствие фиброза появляются раковые опухоли, болезнь печени перерастает в цирроз.

В большинстве случаев инфекция попадает в организм человека по кровеносным сосудам. Диагностируют вирус гепатита С несколькими методами. Отслеживают уровень концентрации антител к ВГС. Инфицирование не произошло, если в крови пациента не будут найдены антитела к ней. В противном случае вирус изучается более глубоко, проводят еще один тест – ПЦР. Только этот метод позволяет идентифицировать РНК вируса спустя всего полторы недели после заражения, во время, когда организм не успевает начать производство антител к инфекции, и последствия заражения никак не отражены на общем состоянии, тем более в результатах других исследований, таких как БАК и биопсия.

Анализ ПЦР на РНК: количественный и качественный. Расшифровка результатов

Вирусная нагрузка или количественный анализ ПЦР – анализ на определение уровня содержания инфекции в плазме. По сути, количественный анализ – это число молекул инфекционной рибонуклеиновой кислоты в одном миллилитре крови.

Р-ДНК – быстрый, дешевый и не самый точный количественный способ определения вируса на основе выявления клеток разветвленной ДНК. Этот тест может не идентифицировать заражение, присутствующее в организме из-за плохой чувствительности – около 450 МЕ/мл.

Количественный метод транскрипционной амплификации позволяет найти в организме клетки РНК. Этот способ появился сравнительно недавно, он стоит недорого и является достаточно эффективным средством диагностики. Чувствительность теста около 10 МЕ/мл.

Попробуем объяснить результаты анализов. Ниже приведена таблица и расшифровка.

Норма для каждого случая

Обнаруженная концентрация молекул инфекции, МЕ/млОписание
отсутствуетРезультат – норма. Инфекция не присутствует в организме или присутствует в настолько малом количестве, что находится ниже порога чувствительности теста
0-1,8х10^2Норма. Количество молекул инфекции меньше допустимых границ
1,8х10² – 8х10^5Не норма. Инфекция присутствует в небольшом количестве.
8х10^5 – 2,4*10^7Не норма. Инфекция в большом количестве
Свыше 2,4*10^7Не норма. Большая опасность. Инфекция сильно выражена

Читайте также по теме

Результат анализа может быть предоставлен исходя и другой классификации – по концентрации копий молекул вируса в единице жидкости. Усредненно можно полагать, что в одной единице МЕ 4 копии на один миллилитр.

Виремия. Роль анализа в диагностике инфекции

Чтобы определить степень активности инфекции в организме, применяют метод исследования виремии. На основе такого анализа специалист дает заключение о возможности заражения пациентом окружающих, вступающих с ним в тесный контакт. Особой значимости набирает этот анализ при опасности передачи инфекции во время беременности от матери к плоду.

Читать еще:  Влияние химиотерапии на печень

Данный тест проходят пациенты, у которых в крови нашлись антитела к инфекции. Примерно четверть больных острым гепатитом С излечиваются самостоятельно, то есть при клинических исследованиях следов вируса не выявляется. По итогам теста врач прогнозирует дальнейшее протекание болезни и назначает соответственное лечение.

Лечебные процедуры назначаются после проведения исследования ПЦР. Высокие показатели по результатам ПЦР снижают шансы на беспрепятственное восстановление здорового состояния организма, низкие же наоборот – повышают.

Также данный тест проходят пациенты уже параллельно с терапевтическими процедурами: в начале первого месяца, конце первого месяца, в конце квартала и через пол года.

Если уровень заражения с течением времени, а в частности в конце первого квартала лечения, не снижается, значит, лечение малоэффективно. Врачу следует изменить вектор терапии.

Снижение активности заражения определяется понижением в десять раз количеством молекул вируса в крови. То есть если на первой неделе было найдено10000 единиц, а в конце квартала 1000 единиц, инфекция считается угасающей, а лечение стоит продолжать.

После окончания курса терапии все равно необходимо отслеживать состояние инфекции, так как существует опасность рецидивной инфекции, т.е. вирус может снова распространяться, а болезнь прогрессировать.

Результат теста может быть некорректным из-за присутствия человеческого фактора при исследовании материала. Лаборантом может быть не соблюдены условия содержания опытных проб, например:

  • попадание грязи на испытуемую пробу
  • присутствие в плазме гепарина
  • наличие в плазме специальных веществ, действующих на реагенты, входящие в состав ПЦР.

В разных клиниках по одному и тому ж анализу могут предоставить отличающиеся результаты. Причина в различном подходе исследований, работе с разными реагентами. Это вполне обычная ситуация. Уберечь себя от неточного результата анализа можно, если сдавать анализы только в своей проверенной клинике.

В дополнение к уровню виремии необходимо идентифицировать генетический тип инфекции, особенно в период назначения и прохождения курса лечения. Стоит понимать, что характер болезни невозможно выявить путем проведения анализа ПЦР. Для этого служат и обязательны к применению другие тесты, такие как биохимический анализ крови (БАК), биопсия печени и так далее.

Как сдать тест на гепатит С

Материал для проведения опыта при гепатитах забирают из локтевой вены. Пациент сдает кровь рано утром до приема еды. Настоятельно рекомендуется ограничить физическую работу, организовать рациональное питание, воздержаться от вредных превычек за день до сдачи анализа. Тогда степень достоверности теста будет значительной. Как правило, исследование материала занимает не больше суток, то есть на следующий день после сдачи можно забирать результаты анализа.

Таблица расшифровки количественного анализа на гепатит С

Заболевание под названием гепатит может серьезно поразить печень и вызвать сильное воспаление. Существует несколько типов гепатита, а вирусы, которые провоцируют развитие заболевания могут делиться по генотипу в зависимости от мутации и географического расположения. Один из распространенных видов заболевания это тип С. Количественный анализ на гепатит С, расшифровка которого проводится лечащим врачом, может протекать в острой форме или перейти в хроническую.

Пути заражения гепатитом

Для определения диагноза проводится соответствующее лабораторное исследование. В качестве первого поверхностного теста может быть использован качественный анализ, который покажет есть ли в организме возбудитель гепатита. Но для установления точной стадии заболевания и назначения лечения необходимо провести количественный тест.

Вирус гепатита передается от человека к человеку. Заболевание имеет инкубационный период, в который симптомы практически не проявляются. Время скрытого течения болезни зависит от иммунной системы человека и количества вируса, которое попало в организм. Медики установили следующие основные пути передачи гепатита С:

  • 47% вероятность заразиться вирусом через кровь при использовании общих нестерильных шприцов во время введения внутривенных наркотиков. Организм, ослабленный влиянием наркотических веществ, не может сопротивляться вирусу и болезнь распространяется.
  • 22% шанс подхватить гепатит при переливании крови. В связи с высоким риском заражения гепатитом, ВИЧ и другими заболеваниями через донорскую кровь, медучреждения подвергают все биологически образцы обязательной проверке перед использованием. Если соблюдается это правило, то риск заражения минимален.
  • 16% риск заражения гепатитом при использовании нестерильных медицинских инструментов. Как правило, все врачи тщательно следят за оборудованием и инвентарем. Но если техника безопасности не соблюдается, возможно заражение гепатитом или другими заболеваниями.
  • 13% шанс передачи вируса от инфицированной матери растущему плоду.
  • 12% вероятность заразиться вирусом при сексуальном контакте без использования презерватива со случайным половым партнером. По статистике для гомосексуальных пар риск выше.

Симптомы заболевания

Нормальным, тое есть здоровым состоянием считается отсутствие каких-либо серьезных проявления недомогания. Опасность вируса гепатита состоит в том, что заболевание может не давать сильных симптомов. Явные признаки заболевания, (рвота, резкое похудение и пр.) проявляются только в 15% случаев. У остальных 85% больных симптомы проявляются достаточно слабо. Необходимо следить за своим самочувствием и реагировать на ухудшение состояния.

  • Наиболее характерный признак проблем с печенью, это желтушность кожи и белка глаз. Эти признаки соответствуют не только вирусу гепатита, но и другим заболеваниям печени.
  • Появление сосудистых звездочек на коже. Мелки капилляры, которые находятся у кожного покрова расширяются в результате присутствия вируса в крови, и появляются «звездочки».
  • «Печеночные ладони» это симптом, который сопровождается покраснением ладоней, а иногда и стоп. Это явление также называется пальмарной эритемой и появляется обычно вместе с сосудистыми звездочками.
  • Раздражающее токсическое воздействие вируса на организм может вызвать кожный зуд.
  • Из-за изменения химического состава крови может быть нарушен показатель свертываемости.
  • Длительное воздействие вируса на организм приводит к нарушению функций мозга (приобретенная энцефалопатия).
  • Возможно появление внутренних кровотечений.
  • Нарушения функций печени может привести к скоплению жидкости в брюшной полости (асцит).
  • В конце дня на ногах больного появляются отеки.

Проявление одного или двух симптомов характерно для самых различных заболеваний. Чаще всего недомогание объясняется физической усталостью или сильной психологической нагрузкой и стрессом. При обнаружении нескольких характерных симптомов из представленного списка имеет смысл сделать количественный анализ на гепатит С.

Виды анализов

Одним из самых надежных и достоверных способов диагностики гепатита это полимеразная цепная реакция или ПЦР. В отличие от других типов исследования (ИФА или РИФ) анализ ПЦР на гепатит позволяет обнаружить непосредственно генетический материал вируса, а не антитела для борьбы с ним. Это дает возможность для точной диагностики. Антитела к вирусу сохраняются в человеческом организме и после полного выздоровления. В таком случае ИФА обнаружит антитела у совершено здорового человека, то есть результат будет положительным. С анализом ПЦР такой проблемы нет.

Норма для показателя составляет число, близкое к нулю. То есть, у здорового человека в принципе не должно быть клеток вируса в организме. ПЦР количественный отражает то число, вирусных клеток, которое обнаружено в исследуемом биологическом образце. Исходя из полученных данных, врач может сделать вывод о степени зараженности организма в целом. Концентрация вируса указывает на стадию заболевания и позволяет отследить приблизительное время заражения.

Количественный показатель

Важно не только правильно подготовиться к анализу и сдать биологический образец в лабораторию, но и расшифровать полученные данные. Это должен делать только квалифицированный врач. Конечно, на бланке с результатом уже имеется информация о принятых нормах и проставлены значения пациента. Однако цифры это еще не все, опыт и медицинские знания позволяют получить больше информации. Таблица показывает, какой результат может показать анализ ПЦР на гепатит тип С количественный:

Содержание вируса
(Ме/мл)
Значение
НетВирус в организме человека отсутствует, это нормальный показатель для здорового человека. Также такой результат может быть, если концентрация вируса ничтожно мала и находится ниже чувствительности теста.
Менее 1,8×10 2Содержание вируса в исследуемом биологическом образце ниже линии границы.
Менее 8×10 5Обнаружено незначительное количество вируса, заболевание в начальной стадии. Для пациента это хороший прогноз, возможность назначения эффективного лечения и полное выздоровление в большинстве случаев.
Более 8×10 5Концентрация вируса высокая, требуется немедленное лечение. Организм подвергается серьезной нагрузке.
Более 2,4×10 7Концентрация вируса очень высокая, выше линейного диапазона. При составлении прогноза учитываются все факторы, лечение может быть длительным, а болезнь может перейти в хроническую форму.

Для лечения гепатита С количественный анализ имеет первостепенное значение. От того, насколько сильно вирус поразил организм, зависит назначение препаратов и дальнейший прогноз для пациента. Кроме концентрации гепатита С в крови, с помощью ПЦР можно определить генотип вируса. И если данный тип возбудителя болезни не характерен для местности, в которой проживает больной, можно отследить путь заражения и предотвратить вспышку гепатита в регионе.

Ложный результат

Расшифровка анализа не менее важна, чем сама процедура. Количественный ПЦР может быть ложным только в результате ошибки, так называемого человеческого фактора. По различным данным вероятность получения ложного результата анализа составляет около 5%. Порча биологического образца возможна при транспортировке и неправильном хранении.

Также имеет место загрязнение рабочего места лаборанта и ошибки во время взятия крови для анализа.

От пациента в данном случае мало что зависит. Но следует уделить максимум внимания выбору лаборатории, в которой будет проводиться исследование. Сегодня любой человек может ознакомиться с отзывами о медицинских учреждениях в интернете и составить мнение о компетентности и профессионализме сотрудников лаборатории. Оснащенность современным оборудованием и положительная реакция людей снижает шансы на получение ложного результата.

Согласно медицинской статистике в 30% случаев заражения гепатитом типа С иммунная система человека может самостоятельно побороть заболевание без использования медицинских препаратов. В остальных 70% случаев без врачебного вмешательства болезнь перетекает в хроническую форму и остается навсегда, постепенно разрушая печень и сокращая длительность жизни человека. Количественный анализ на гепатит С с расшифровкой позволяет, как диагностировать заболевание в начальной стадии, так и отслеживать периоды обострений хронической формы заболевания.

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector